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Pull down筛靶策略

小分子药靶筛选的Pull down实验是一种有效的筛选药物与潜在靶蛋白之间相互作用的体外技术，Pull down实验基本原理是将小分子药物固定在某种基质上，充当“钓饵”，与蛋白裂解液进行孵育，孵育结束后与化合物结合的蛋白可以通过对基质的分离而分离出来。该方法简单易行，操作方便，在药靶筛选方面已得到广泛的应用。

详情介绍

小分子药靶筛选的Pull down实验是一种有效的筛选药物与潜在靶蛋白之间相互作用的体外技术。利用生物分子之间的亲和力原理，将生物素标记的小分子化合物固定在链霉亲和素的磁珠上，与蛋白裂解液进行孵育，孵育结束后与小分子结合的蛋白可以通过质谱检测，将下游的靶点蛋白鉴定出来。该方法简单易行，操作方便，在药靶筛选方面已得到广泛的应用。

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丨技术优势

1. 不受结合原理限制，适用范围广

2. 研究方向明确，筛选到的是与研究方向相关的靶点蛋白

3. 鉴定到的靶点蛋白数量较多

4. 可检测到细胞内与小分子结合的靶点蛋白及其互作网络谱

丨经典文章

研究案例1：Pull down +MS筛选苏木酮A的抗炎靶点

2017年7月北京大学屠鹏飞教授团队利用Biotin-SA探针进行Pull down+MS实验“垂钓”苏木酮（SA）的潜在靶点蛋白，发现肌苷单磷酸脱氢酶2（IMPDH2）是SA的关键作用靶点，通过SPR和CETSA实验进一步验证了SA与IMPDH2的直接作用关系，后续通过功能性试验证明了苏木酮A在抗神经炎症方面的作用功效。

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研究案例2：Pull down +MS助力揭示天然代谢物促肿瘤的新机制

国家生物医学分析中心南湖实验室满江红/周涛团队利用Pull down +MS技术鉴定代谢物磷酸肌酸在胶质母细胞瘤干细胞中的互作蛋白。研究发现磷酸肌酸通过靶向结合BRD2，抑制其降解，对胶质母细胞瘤干细胞进行表观遗传重编程，最终加速GBM进展的作用机制。本研究帮助我们深入理解胶质母细胞瘤干细胞的代谢特性，也为GBM的治疗提供了新的思路。

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丨参考文献

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